Hur isolera plast förnedrande bakterier från marken! (3 / 5 steg)
Steg 3: resultat
1. Förbered flera sterilt provrör med Bushnell Hass buljong med en autoklav. (Glöm inte att märka dem!)
2. efter att du har väntat en viss tidslängd måste du öppna din Winogradsky kolumner, genom att ta bort toppen som du tejpade på efter att du gjort dem.
3. använda sterila handskar ta bort plasten från kolumnerna Winogradsky och placera dem i korrekt märkta provrör.
4. Förslut rören och skaka runt dem för att ta bort alla mikrober som växer på ytan.
5. Använd aseptisk teknik, ta lågan steriliserad pincett och ta bort plasten och placera den på en snabbtorkande material, som papertowels eller filterpapper. Plasten är ok att vara kontaminerade vid denna punkt med den filter papper eller papper handdukar men be noga med att täta provröret tillbaka upp omedelbart! Nu har du förhoppningsvis bara din plast ätande mikrober i din provrör med inga föroreningar.
6. Använd aseptisk teknik med en inoculating loop, öppna provröret och doppa inoculating slingan i vätskan. Ta sedan bort vaccinera öglan och stek på en märkt agar tallrik (beroende på vilken sort du valt att använda), använder standard strimmor tekniker. Plattorna kan förvaras i rumstemperatur eller i en inkubator.
7. samtidigt bär handskar överkörd plast för att hjälpa rensa bort all smuts som kan fortfarande finnas lite vatten, placera sedan tillbaka på hushållspapper eller filterpapper. Att plast för att sitta för upp till ett par dagar så att den är helt torr! Det är super viktigt att få plast för att vara helt torr.
8. invägning tid. Använder samma skala används innan för plast, väga dem igen. Hoppa upp och ner om de gått ner i vikt. Skrapa huvudet och ser förbryllad om de gått upp i vikt.
9. Observera pläterar för tillväxt, något växande skulle kunna representera en sann plast förödmjukare.
10. (tillval från och med nu) om du vill ta reda på exakt vilka mikrober på plattan var ansvariga för viktminskning du kan försöka isolera dem på sina egna tallrikar av strimmor ut en enda koloni.
11. Fortsätt tills du har isolerat kolonier av mikrober. Förbereda Bushnell Hass buljong rör. (sterilisera inte ännu)
12. skär upp nya plastpåsar, väga dem och placera dem sedan i lämpliga provröret. Var noga med att märka ett provrör kontroll.
13. sterilisera alla rören, med plasten i dem. Toppa rören så att buljongen helt fyller röret.
14. Inokulera varje provrör med en olika isolerade mikrob från din isolering pläterar. (var noga med att hänga på isolering pläterar)
15. vänta lika länge tid du väljer att använda vid den första delen av detta experiment.
16. skaka rören och sedan, med hjälp av aseptisk teknik, ta bort plasten, som i steg 5. Kort skölj plast med vatten och torka under flera dagar.
17. väg torr plast bitar att förhoppningsvis Observera viktminskning. Se till att faktor i kontroll plast (dvs. om kontroll plast förlorade 0,05 g i vikt, sedan en experimentell plastbit som verkar ha förlorat 1,85 g faktiskt bara förlorade 1,80 g)
18. alla isolat som bryts ned plasten är nu lätt att isolera (från isolering plattan, eller provröret) och kan identifieras med hjälp av olika biokemiska tester eller tester kit.