Arduino PCR (termocykel) för under $85 (1 / 11 steg)
Steg 1: Läs mer om PCR
PCR består av 3 steg som är cyklade om och om igen:
Denaturering (~ 94C) i detta steg, DNA "bryter isär", dela upp från en dubbelspiral i singeln strandar
Glödgning (~ 60C) Primers bond till enkelsträngat DNA
Förlängning (~ 72C) polymeras komplimanger DNA, syntetisera delarna av målet sekvensen
Var och en av dessa faser kan vara 20-30 sekunder lång och upprepade 30 + gånger, beroende på protokollet. De flesta protokoll tyder också på att ha en längre inledande denaturering steg och en längre sista förlängning.
En enkel tutorial:
http://www.dnalc.org/Resources/Animations/PCR.html
Det finns också en massa relaterade resurser här: http://www.lab-manual.com/lm_209.htm
Resultaten av PCR kan visualiseras med hjälp av gelelektrofores. DNA-prover läses in i en gel och en hög spänning appliceras över den. Eftersom DNA är negativt laddat, kommer att det resa genom gelen i olika hastigheter beroende på dess storlek. Denna process kommer effektivt att skilja ut de bitar du vill ha, och du kan se dem av färgning gelen. Här är en bra handledning och om du försöker att DIY det, Macgyver projekt är en ganska bra resurs.
PCR kan utföras med 3 vattenbad (varje hålls på en av de tre temperaturinställningar). En människa kunde fysiskt flytta proven från en bad till nästa 30 + gånger. PCR-maskiner har utvecklats för automatisering av processen, men de flesta laboratoriet-kvalitet som kostar tusentals dollar. Men de behöver inte! Idag finns det ett växande antal projekt i öppen källkod PCR, bland dem OpenPCR (600$), LavaAmp ($200) och kaffe kopp PCR (350$).