Mäta bakterietillväxt genom kvantitativa kloroplast uppskattning (4 / 5 steg)
Steg 4: Döda celler
Figur 3: Släppa kloroplaster från deras döda Host bakterier
Tillsätt 1mL metanol mikrocentrifug rör. Se till att cap metanol behållaren när det inte används. Metanol är en flyktiga kemiska, vilket innebär att det avdunstar vid rumstemperatur. Vortex alla prover så att alla celler är trasiga och kloroplaster frigörs. Detta är särskilt viktigt om det finns något i media med bakterier (t.ex. smuts eller katalytisk metaller). Följ instruktionerna på din vortex att använda det, även om de flesta aktiveras, när den slås på, genom att trycka på din röret ner på plattan. Se figur 3.
Vi rekommenderar att du använder en virvel för att bryta cellerna öppet. Men om det inte finns en virvel kan detta steg också göras genom att skaka kraftigt mikrocentrifug rör. Även omskakas kan ta bara sekunder, rekommenderar vi skakar i minst 5 minuter. Några synliga partiklar ska lossna i sidor och botten av röret. Om du också använder cyanobakterier, bör provet förlorar sin gröna färg och bli blå.