Utforska din arvsmassa! (15 / 18 steg)

Steg 15: Avancerad DIYBio genetisk analys: DNA-extraktion

De flesta professionella genetiker, mig inkluderad, har lyxen att ha en forskning-grade och/eller GLP anläggning att göra laborationer i. Även om jag inte gör någon DIYBio projekt på arbetet, det råd mig möjligheten att bekanta mig med molekylärbiologiska tekniker innan jag försöker återskapa dem hemma.

Särklass, en de svåraste teknikerna för att göra hemma är också en av de mest grundläggande för vår förståelse av genetik, DNA-extraktion och Polymerase Chain Reaction (PCR).

Flera Instructables användare har redan skrivit om DIY DNA-extraktion. Varje metod har sina fördelar och nackdelar och är i slutändan inte som effektivt eller förorening-fri som standard laboratorium tekniker använda silica kolumner eller magnetiska pärlor. Den enklaste metoden för DIY-biologer använder papper slag, liknar blod fläck kort, som utnyttjar värme (från en termocykel i PCR) som den huvudsakliga DNA extraktion metoden men det är också den minst effektiva på grund av PCR-hämmare (för mänskligt DNA, blod eller kinden kompresser kan användas till papper). Den andra metoden populär för DIY biologer använder tvättmedel och alkohol, en svårare process eftersom de två vätskorna är blandbar, men två ' ibles här och här gör ett utmärkt jobb med att förklara det. Du kan också experimentera med andra rengöringsmedel/proteaser, jag har sett diskmedel, schampo och kött mörningsmedel alla används.

Personligen är jag partisk för alkohol och tvättmedel/proteas metoden för sin högre effektivitet och avkastning, om stor omsorg måste användas i minimera kontaminering och överföring av alkohol och rengöringsmedel/proteaser. Effekterna av överföring kan minimeras genom att använda steriliserade överföring verktyg (15 minuter i en tryckkokare med destillerat vatten) och fullt torkning DNA pelleten i en steril miljö (google steril teknik, en alkohol lampa kan ersättas med en bunsenbrännare i de flesta program).

Super DIY-biologer kan upp sitt spel genom att bygga en spektrofotometer för att kvantifiera deras DNA. Jag kommer inte att täcka detta här, men kan du antingen titta in modifiera ett från Offentliga Labs eller genom följande en av flera instructables på den. Hursomhelst, du har att bygga det så att det accepterar cuvettes med vätska i dem.